【多聚甲醛】知己知彼百战不胜

时间:2015-9-6 点击:2793次

    多聚甲醛固定的细胞可以多久才检测？如果须分次收集细胞，那么，请用4%多聚甲醛固定后放在4度冰箱保存，放一周应该不会影响后期操作。
    多聚甲醛作为固定液的具体使用方法：
    1.在孔板中直接加入4%多聚甲醛。静置15min，用PBS洗2遍就可以了。
    2.用玻璃刀将载玻片切割成小块，大小根据你细胞种在哪个培养体系具体定。一般使用24孔和6孔板。切割好的玻片高压灭菌，然后用多聚赖氨酸（具体浓度请你自己查）溶液浸泡，随后取出，超净台下凉干，这样就制备好了包被过的玻片，有利于细胞贴附、爬板。其余的试剂和材料与一般的细胞培养一致。将细胞消化下来，配成合适的细胞悬液，种入已放有包被过的载玻片的培养板中，常规培养。但注意，取放板子要轻柔，不要频繁移动载玻片。一段时间后你就会看见细胞在玻片上涨起来了，等到细胞数量合适，超净台下用镊子取出载玻片去做免疫组化就OK了。